Начало раздела Производственные, любительские Радиолюбительские Авиамодельные, ракетомодельные Полезные, занимательные	Хитрости мастеру Электроника Физика Технологии Изобретения	Тайны космоса Тайны Земли Тайны Океана Хитрости Карта раздела
Использование материалов сайта разрешается при условии ссылки (для сайтов - гиперссылки)

ИЗОБРЕТЕНИЕ
Патент Российской Федерации RU2286790

СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ СТРЕССОВОГО НЕДЕРЖАНИЯ МОЧИ

Имя изобретателя: Кулаков Владимир Иванович (RU); Сухих Геннадий Тихонович (RU); Балан Вера Ефимовна (RU); Сметник Вера Петровна (RU) 
Имя патентообладателя: Государственное учреждение Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии Российской академии медицинских наук
Адрес для переписки: 117997, Москва, ул. Акад. Опарина, 4, ГУ НЦ акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН, Директору
Дата начала действия патента: 2005.03.16 

Изобретение относится к области медицины и касается лечения стрессового недержания мочи у женщин путем введения фетальных стволовых клеток. В рабдосфинктер парауретрально вводят 40 млн. стволовых миобластов и фибробластов, полученных от плодов 8-12 недель гестации, при соотношении клеток 5-4:3-2. Способ расширяет арсенал средств лечения стрессового недержания мочи у женщин, позволяет исключить хирургическое вмешательство.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к терапии, в частности к способам лечения стрессового недержания мочи.

Урогенитальные расстройства в климактерии - комплекс вагинальных и мочевых симптомов, развитие которых является осложнением атрофических и дистрофических процессов в эстрогензависимых тканях и структурах нижней трети мочеполового тракта: мочевом пузыре, уретре, влагалище, связочном аппарате и мышцах тазового дна.

В настоящее время единственным способом лечения стрессового недержания мочи является хирургический, который насчитывает более 200 модификаций (Х.Хирш, О.Кезер, Ф.Икле "Оперативная гинекология" Изд-во ГЭОТАР Медицина, М., 1999, стр.407).

Недостатком способа являются высокая частота рецидивов и осложнения, обусловленные хирургическим вмешательством.

Описана попытка лечения недержания мочи у 8 пациентов путем трансуретральной инъекции в рабдосфинктер и уретру комбинации аутологичных стволовых клеток, производных мышечной ткани и клеток соединительной ткани (Shiomo Pas MD "Stem cell offer exciting approach to urinary incontinence treatment" Urology Times 1 July, 2004).

Хотя популяция плюрипотентных клеток была получена из скелетных мышц, однако авторы публикации не приводят данных, подтверждающих, что используемые клетки на самом деле были стволовыми, равно как и об успехе лечения во временном интервале.

Недостатком способа является его длительность, связанная с необходимостью забора клеточного материала и выращиванием стволовых клеток на его основе.

Задача изобретения - упрощение способа лечения стрессового недержания мочи у женщин за счет использования более доступного аллогенного клеточного материала.

Поставленная задача решается способом лечения недержания мочи, заключающимся в том, что вводят аллогенные эмбриональные или фетальные соматические стволовые клетки человека - миобласты и фибробласты при их соотношении 5-4:3-2 парауретрально в рабдосфинктер.

Получение культуры клеток, обогащенной миобластами человека для последующей трансплантации.

Трупный абортивный материал доставляли в аутопсийный блок в термоконтейнере (+4°С) не позднее, чем через 4 часа после искусственного прерывания беременности. Плоды отмывали стерильным физиологическим раствором с антибиотиками. Поперечно-полосатые мышцы выделяли из плодов человека 8-12 недель гестации, отмывали забуференным физиологическим раствором (PBS) рН 7,3 с добавлением антибиотиков. Фрагменты мышечной ткани подвергали механической диссекции в стерильных чашках Петри (35 мм) до размеров не более 1,0 мм × 1,0 мм. Дважды отмывали PBS, центрифугируя при 800 g в течение 3-х минут. Кусочки мышечной ткани диссициировали на отдельные клетки инкубацией при 37°С с 0,2% коллагеназой в течение 15 минут. Затем отмывали дважды PBS.

Популяцию клеток, обогащенную миобластами, помещали в культуральные флаконы в концентрации 500000 кл/мл в среде для культуры клеток: F12 и DMEM в соотношении 1:1, с добавлением фетальной эмбриональной сыворотки, L-глютамина, хепеса, бикарбоната натрия, антибиотиков. Клетки культивировали при 37°С в атмосфере с 5% СО₂ до получения монослоя, фибробласты удаляли при пассировании. Смену среды проводили каждые 3 дня на 50-75%. Суспензию, обогащенную миобластами, культивировали по вышеописанной схеме до 3 пассажа, затем использовали для трансплантации или замораживали по стандартной программе с переносом в жидкий азот.

Получение культуры клеток фибробластов человека для последующей трансплантации.

Трупный абортивный материал доставляли в аутопсийный блок в термоконтейнере (+4°С) не позднее, чем через 4 часа после искусственного прерывания беременности. Плоды отмывали стерильным физиологическим раствором с антибиотиками. Ткань кожи выделяли из плодов человека 8-12 недель гестации, отмывали забуференным физиологическим раствором (PBS) рН=7,3 с добавлением антибиотиков. Фрагменты кожи подвергали механической диссекции в стерильных чашках Петри (35 мм) до размеров не более 1,0 мм × 1,0 мм. Дважды отмывали PBS, центрифугируя при 800 g в течение 3-х минут. Кусочки мышечной ткани диссициировали на отдельные клетки инкубацией при 37°С с 0,2% коллагеназой в течение 25 минут. Затем отмывали дважды PBS.

Популяцию клеток, обогащенную фибробластами, помещали в культуральные флаконы в концентрации 500000 кл/мл в среде для культуры клеток: F12 и DMEM в соотношении 1:1, с добавлением 10% фетальной сыворотки теленка, L-глютамина, хепеса, бикарбоната натрия, антибиотиков. Клетки культивировали при 37°С в атмосфере с 5% СО₂ до получения монослоя. Смену среды проводили каждые 3 дня на 50-75%. Фибробласты культивировали по вышеописанной схеме до 3 пассажа, затем использовали для трансплантации или замораживали по стандартной программе с переносом в жидкий азот.

Нижеследующий пример иллюстрирует способ по изобретению.

Больная Л.К., 55 лет, страдает стрессовым недержанием мочи в течение 5 лет. Кашлевая проба положительна, проба Вальсалвы положительна, комплексное уродинамическое исследование - недостаточность замыкательного аппарата мочевого пузыря, снижение максимального внутриуретрального давления на 50%, лечение заместительной гормональной терапией без эффекта. Пациентке парауретрально в рабдосфинктер ввели 40 млн. эмбриональных стволовых миобластов и фибробластов при соотношении клеток 4:2.

Наблюдение за больной уже через две недели показало клиническое улучшение:

1. Удерживает мочу при нагрузке (кашель, смех).

2. Проба Вальсалвы отрицательна.

Дальнейшее наблюдение за пациенткой (в течение 5 месяцев) показало сохранение лечебного эффекта.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ лечения стрессового недержания мочи у женщин путем введения клеточного материала в рабдосфинктер, отличающийся тем, что в рабдосфинктер парауретрально вводят 40 млн. стволовых миобластов и фибробластов, полученных от плодов 8-12 недель гестации, при соотношении клеток 5-4:3-2.

Версия для печати
Дата публикации 06.01.2007гг

НОВЫЕ СТАТЬИ И ПУБЛИКАЦИИ
	Технология изготовления универсальных муфт для бесварочного, безрезьбового, бесфлянцевого соединения отрезков труб в трубопроводах высокого давления (имеется видео)
	Технология очистки нефти и нефтепродуктов
	О возможности перемещения замкнутой механической системы за счёт внутренних сил
	Свечение жидкости в тонких диэлектрических каналох
	Взаимосвязь между квантовой и классической механикой
	Миллиметровые волны в медицине. Новый взгляд. ММВ терапия
	Магнитный двигатель
	Источник тепла на базе нососных агрегатов